慢病毒可以很好的侵染分裂细胞及非分裂细胞来介导在目的细胞中表达外源基因。目前,大部分制备高滴度慢病毒需要超高速离心,然而,超高速离心机制备高滴度慢病毒很难成为实验室里的常规操作。在这篇论文中,相对离心力浓缩慢病毒的效率进行了系统的探索,蔗糖梯度离心,相对离心力≤10,000 g可以生产慢病毒滴度到达2×10(8) TU/ml。优化的蔗糖浓度为10%,浓缩效率超过80%。另外,慢病毒上清原液与浓缩后的慢病毒,放在4度储存的侵染能力呈现指数下降,大约在1.3天,都下降50%。高滴度慢病毒产品进行反复冻融,侵染能力也呈现指数下降,反复冻融1.1次,下降50%。因此,我们描述了一个有效且简单的方法来制备高滴度慢病毒。
Jiang, W., Hua, R., Wei, M., Li, C., Qiu, Z., & Yang, X., et al. (2015). An optimized method for high-titer lentivirus preparations without ultracentrifugation. Scientific Reports , 5.